Camau Penodol Ar Gyfer Echdynnu Cloroffyl Trwy Ddarnio Cell Gan Ddefnyddio Malwr Cell Ultrasonig
Feb 20, 2024
Mae malwr celloedd ultrasonic yn defnyddio effaith gwasgariad uwchsain mewn hylif i greu cavitation, a thrwy hynny dorri gronynnau solet neu feinweoedd celloedd yn yr hylif.
Mae datblygiad y diwydiant biolegol wedi codi'r gofynion ar gyfer arbrofion gan ddefnyddio pulverizers celloedd ultrasonic, megis mesur a rheoli tymheredd sampl, gwella lefel cudd-wybodaeth samplau oeri tymheredd isel a'r peiriant cyfan, ac ati.
Y camau penodol ar gyfer echdynnu cloroffyl trwy falu celloedd ultrasonic gan ddefnyddio gwasgydd celloedd ultrasonic:
1. Centrifuge neu hidlo'r sampl dŵr a gosod pilen hidlo ffibr asetad ar yr hidlydd sugno. Arllwyswch sampl cyfaint meintiol o ddŵr i'w hidlo, ac ni ddylai'r pwysau negyddol yn ystod hidlo fod yn rhy uchel (tua 50kPa). Ar ôl i'r sampl dŵr gael ei dynnu, parhewch i dynnu llun am 1-2 munud i leihau'r lleithder ar y bilen hidlo. Os oes angen storio tymor byr am 1-2 diwrnod, gellir ei storio mewn oergell reolaidd i'w rhewi. Os oes angen storio hirdymor (30 diwrnod), dylid ei storio mewn oergell tymheredd isel (-20 gradd).
2. Tynnwch y bilen hidlo sy'n cynnwys ffytoplancton allan a'i sychu ar dymheredd isel yn yr oergell am 6-8 awr. Torrwch ef yn ddarnau bach gyda siswrn a'i roi mewn tiwb centrifuge 5ml neu 10ml. Ychwanegu 3-4 ml o 90% aseton i drochi'r darnau o dan y lefel hylif. Rhowch y darnau mewn cynhwysydd ultrasonic a defnyddiwch donnau ultrasonic i dorri celloedd y sampl. (Cymharu arbrofion ar wahanol adegau ac amleddau i hwyluso adnabod amser darnio * ac amlder ar gyfer dulliau unedig).
3. Centrifuge y sampl yn destun darnio cell gan ddefnyddio uwchsain gan ddefnyddio centrifuge (3000-4000r/mun) am 10 munud. Arllwyswch y supernatant i fflasg gyfeintiol 5ml neu 10ml. Gwanhau i 5ml neu 10ml gyda 90% aseton a ysgwyd yn dda.
4. Rhowch y supernatant ar sbectroffotomedr a defnyddio dysgl lliwimetrig llwybr optegol 1cm i ddarllen y gwerthoedd amsugnedd ar donfeddi o 750nm, 663nm, 645nm, a 630nm, yn y drefn honno. Defnyddiwch aseton 90% fel mesuriad amsugno gwag i gywiro amsugnedd y sampl.
